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小鼠ELISA試劑盒在實驗前要做好哪些準備工作☁•╃·?

釋出時間₪◕☁: 2022-03-29  點選次數₪◕☁: 240次
  小鼠elisa試劑盒是一種敏感性高▩↟,特異性強▩↟,重複性好的實驗診斷方法▩✘。由於其試劑穩定☁₪••、易儲存▩↟,操作簡便▩↟,結果判斷較客觀等因素▩↟,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中▩✘。
 
  小鼠ELISA試劑盒的實驗原理₪◕☁:                                     
  將目標抗體包被於96孔微孔板中▩↟,製成固相載體▩↟,向微孔中分別加入標準品或標本▩↟,其中的目標連線於固相載體上的抗體結合▩↟,然後加入微生物化的目標抗體▩↟,將未結合的生物素抗體洗淨後▩↟,加入HRP標記和親和素▩↟,再次徹底洗滌後加入TMB底物顯色▩✘。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色▩↟,並在酸的作用下轉化成最終的黃色▩✘。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關▩✘。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)▩↟,計算樣品濃度▩✘。
 
  實驗前的準備工作₪◕☁:
  1☁₪••、準備好所有實驗額外所需物品▩↟,如試管 吸頭 移液器 離心機等;
  2☁₪••、確定試劑盒在有效期內;
  3☁₪••、仔細閱讀說明書;
  4☁₪••、按說明書確定所有試劑齊全(數量 體積);
  5☁₪••、標本製備要規範▩↟,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量製備(貯存)▩↟,儘量分裝做備份;
  6☁₪••、根據檢測標本數量確定所需試劑的量;
  7☁₪••、按說明書將所用試劑盒平衡至室溫▩↟,配製所需試劑▩✘。
 
  小鼠ELISA試劑盒的洗板方法₪◕☁:
  1☁₪••、手工洗板方法₪◕☁:將推薦的洗滌緩衝液至少0.4ml注入孔內▩↟,浸泡1-2分鐘▩↟,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體▩↟,在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙▩↟,酶標板朝下用力拍幾次▩↟,根據需要▩↟,重複此過程數次▩✘。
  2☁₪••、自動洗板₪◕☁:如果有自動洗板機▩↟,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中▩✘。本試劑盒可同時檢測▩↟,且與其它相關蛋白無交叉反應▩✘。
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